詳細(xì)內(nèi)容

　　蛋白檢測(cè)   Western Blot  NP40裂解液(帶有抑制劑)
 

　　產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

　　N-40裂解液INP-40Lysi Bufer)是 種比和的細(xì)胞組織烈解液，其烈解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Westemn、P和co-IP等。用NP-40裂解液烈解得到的蛋白樣品，可以使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測(cè)定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

　　保存條件:

　　裂解液保存于2~8°C，其他保存于-20°C，一年有效

　　操作流程:

　　1、試劑準(zhǔn)備

　　取適當(dāng)量的裂解液，在使用數(shù)分鐘內(nèi)將蛋白酶抑制劑復(fù)合物或 和磷酸酶抑制劑復(fù)合物按照1:50加入裂解液中，或者使用100mM的PMSF，并使PMSF的終濃度為1mM.

　　2、細(xì)胞組織的裂解

　　對(duì)于貼壁細(xì)胞: 去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔加入150-250工裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)烈解10分鐘:對(duì)于縣浮細(xì)胞: 離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔L板每L細(xì)胞加入150-250L裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬(wàn)細(xì)胞 管，然后再裂解。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果用于ChI，初步裂解后需在水浴上繼續(xù)裂解10分鐘。對(duì)于組織樣品: 用組織剪將組織剪成碎片后，按照每20mg組織加入150-250L裂解液的比例加入裂解液并使用用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。如果用于ChI，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)烈解10分鐘。

　　3、蛋白樣品收集

　　充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作.

　　注意事項(xiàng):

　　1、為取得佳的使用效果，可以適當(dāng)分裝后-20%C保存使用，避免過(guò)多的反復(fù)凍融:2、裂解樣品的所有步驟都需在冰上或2~ 8C進(jìn)行:

　　溫要提示:為了您的自身安全，使用試劑，請(qǐng)做好防護(hù)，如穿實(shí)驗(yàn)服，帶手套等.

　　蛋白檢測(cè)   Western Blot  NP40裂解液(帶有抑制劑) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

更新時(shí)間：2024/9/18 10:33:25

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