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BUNSEN本生闡述：低吸附離心管需掌握的關(guān)鍵點
閱讀次數(shù)：339 發(fā)布時間：2023/6/26 10:56:22

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　　BUNSEN本生闡述：低吸附離心管需掌握的關(guān)鍵點

　　低吸附離心管常用于對蛋白質(zhì)進行濃縮和除鹽操作，對色譜洗液和生理梯度片斷進行緩沖液交換或者除鹽操作，從細(xì)胞的細(xì)菌培養(yǎng)上清液或者溶菌液中回收生物分子。清洗和濃縮乳膠懸浮液，離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過對于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白溶液來說，用膜濃縮，回收率常常是不定量的，雖然PES材料使非特異性吸附小化，但是，某些蛋白，特別是稀的時候會有問題，非特異性結(jié)合的程度隨著個別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同，含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。

　　低吸附離心管離心時注意事項：避免過長時間或者高速離心，雖然我們產(chǎn)品有防死端設(shè)計，可避免過度離心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附，避免過度濃縮，終體積越小，越容易因表面吸附而損失得率，離心后采用輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液，必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面，有助于減少膜表面吸附，能提高回收率，盡量避免TIPS接觸膜表面。

　　對于低吸附離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失，大多數(shù)情況下，在濃縮稀釋蛋白溶液之預(yù)處理柱子可以提高回收率，因為溶液可填滿膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點，鈍化的方法是預(yù)先用高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子一小時以上，蒸餾水徹底沖洗柱子，再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液，注意鈍化處理后別讓膜干了，如果要留待以后使用，需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤。

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