技術(shù)文獻
elisa出現(xiàn)全板空白的原因
ELISA實驗中出現(xiàn)全板空白的原因主要包括以下幾個方面:
試劑問題:試劑盒在運輸、保存期間放置的溫度過高,時間過長,導(dǎo)致抗原、抗體效價下降,酶的活力降低;試劑盒已經(jīng)超出保存的有效期,抗原抗體效價下降,酶的活性降低。
操作問題:漏加或者誤加試劑,如忘記加酶、忘記加顯色液、酶或顯色液污染失效等。
樣本問題:樣本存在內(nèi)源性干擾物質(zhì),樣本溶血、貯存過久、凝集不全、被細菌污染等。
設(shè)備問題:洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈含HRP酶抑制物;洗滌液配制有誤等。具體原因分析:
試劑問題:試劑盒在運輸、保存期間放置的溫度過高,時間過長,導(dǎo)致抗原、抗體效價下降,酶的活力降低;試劑盒已經(jīng)超出保存的有效期,抗原抗體效價下降,酶的活性降低。
操作問題:漏加或者誤加試劑,如忘記加酶、忘記加顯色液、酶或顯色液污染失效等。
樣本問題:樣本存在內(nèi)源性干擾物質(zhì),樣本溶血、貯存過久、凝集不全、被細菌污染等。設(shè)備問題:洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈含HRP酶抑制物;洗滌液配制有誤等。
解決方法:
檢查試劑:確保試劑在有效期內(nèi)使用,避免高溫存放;檢查試劑是否有過期或失效的情況。13規(guī)范操作:嚴格按照操作規(guī)程進行,避免漏加或誤加試劑;每次加液核對標(biāo)簽,確保無誤。
處理樣本:避免樣本溶血、污染、過久儲存等現(xiàn)象;檢查樣本中是否存在內(nèi)源性干擾物質(zhì)。
設(shè)備檢查:使用干凈的器皿配制試劑,確保洗滌液正確配制;校正溫育箱溫度,確保溫育時間和溫度足夠。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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