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ELISA實驗稀釋血清具體步驟 2024已更新(每日/實時)
閱讀次數:10 發(fā)布時間:2024/8/13 10:46:40
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  ELISA實驗稀釋血清具體步驟

  在生物醫(yī)學研究中,ELISA(酶聯免疫吸附測定)實驗是一種為重要且廣泛應用的技術,它利用抗原與抗體之間的特異性結合反應,通過酶促反應顯色來定量或定性檢測樣品中的特定蛋白、激素、抗體等生物分子。在進行ELISA實驗時,稀釋血清是至關重要的一步,它不僅關系到實驗結果的準確性,還直接影響到實驗的可重復性和靈敏度。下面,BUNSEN本生小編將詳細闡述ELISA實驗中稀釋血清的具體步驟及注意事項。

  一、實驗準備

  1 材料準備 -

  ELISA試劑盒:確保試劑盒在有效期內,并按照說明書要求儲存。

  - 血清樣本:新鮮或冷凍保存的血清樣本,避免反復凍融。

  - 稀釋液:試劑盒提供的用稀釋液或PBS(磷酸鹽緩沖液)等適宜的稀釋介質。

  - 移液器及槍頭:確保干凈無污染,槍頭規(guī)格根據需要轉移的體積選擇。

  - EP管或96孔板:用于稀釋血清及后續(xù)實驗步驟。

  - 振蕩器:用于混合稀釋后的血清,確保均勻。

  2 環(huán)境準備 - 實驗區(qū)域應整潔、無塵,避免交叉污染。

  - 溫度控制在適宜范圍內,通常室溫即可,但某些特定實驗需遵循試劑盒要求。

  二、稀釋血清的步驟

  1 確定稀釋比例 - 根據實驗目的和試劑盒說明書,確定血清的稀釋比例。通常,ELISA試劑盒會提供推薦的稀釋范圍或具體稀釋倍數。

  若無明確說明,可行預實驗,通過不同稀釋比例的血清檢測,確定稀釋度。

  2 稀釋操作

  1. 標記EP管或孔板:清晰標記每個EP管或孔板上的樣本編號、稀釋比例及日期等信息。

  2. 加入稀釋液:先,向每個EP管或孔板中按需要量加入稀釋液。例如,若計劃進行1:100稀釋,先加入99μL稀釋液。

  3. 加入血清樣本:使用移液器準確吸取1μL血清樣本,緩慢加入已含有稀釋液的EP管或孔板中,同時輕輕吹打或振蕩混勻,避免產生氣泡。

  4. 重復稀釋:若需進一步稀釋,可從上一步驟的稀釋液中再取適量加入新的稀釋液中,重復上述操作,直至達到所需的稀釋比例。

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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司

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