技術(shù)文獻
胎牛血清注意事項及有必要做熱滅活嗎?
很多客戶在訂購胎牛血清的時候,都會問到胎牛血清的注意事項及熱滅活,胎牛血清注意事項及熱滅活到底是什么呢?讓我們一起來了解胎牛血清。下面是胎牛血清的注意事項及熱滅活:
胎牛血清注意事項:
1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。
C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.
3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56。C,30分鐘的原則,并且隨時搖 晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
6、血清解凍后發(fā) 現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離 心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方 法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
何謂熱滅活?
一般是以56C,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化, 而補體所參與的反應(yīng)有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增 強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。
有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影 響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯 著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點",常常會讓研究者誤以為是血 清遭受污染,而把血清放在37C環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生 物的分裂擴增。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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