技術(shù)文獻
BUNSEN熱點| 微孔板的選擇會面臨哪些問題呢?
微孔板使用常見問題
Q1:如何選擇微孔板的顏色?
1、熒光檢測
黑色微孔板能吸收光,因此可抑制自發(fā)熒光的影響,適用于GFP、熒光素、Cy3和Cy5 等短半衰期(納~微)熒光檢測。對于使用半衰期較長(微~毫)的鑭系元素螯合物等的檢測,可使用時間分辨熒光檢測法來避免自發(fā)熒光影響,通常推薦使用白色微孔板,但如果檢測中存在較大的交叉干擾,則需要使用黑色微孔板。
2、發(fā)光檢測
通常使用光反射效率較高的白色微孔板。如需避免交叉干擾,可使用灰白色 (AlphaPlate)、灰色或黑色微孔板。此外,磷光(指微孔板等物質(zhì)受到熒光燈等光的照射后蓄存發(fā)光的現(xiàn)象)也是造成背景增強的原因。黑色微孔板可抑制這種現(xiàn)象帶來的影響。對于白色微孔板,在檢測將其遮光約10分鐘以達到暗適應(yīng),即可降低磷光影響。
Q2:關(guān)于邊緣效應(yīng)的問題
關(guān)于邊緣效應(yīng)的類型與解決方案的信息如下:
、贉囟忍荻龋嚎赏ㄟ^在測定將微孔板的溫度預(yù)先調(diào)整為與檢測儀相同的溫度來解決。
、谡舭l(fā):可使用板蓋或密封膜來防止蒸發(fā)。此外,將培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度設(shè)到100%附近也有幫助。
、坩槍毎麑嶒炛谐霈F(xiàn)的邊緣效應(yīng),有報告稱在將微孔板放入37℃的培養(yǎng)箱,先將微孔板置于室溫下預(yù)孵育1小時可有助于細胞均勻粘附。
Q3:1/2 AreaPlate是指什么?
相對于常見的96孔微孔板,孔徑約為其一半的微孔板。即使較少的液體體積也能樣品達到較高深度,避免了液體體積不足造成的信號低下。
Q4:AlphaScreen/AlphaLISA 需要使用門的微孔板嗎?
AlphaPlate采用白色微孔板和灰色微孔板的中間色—灰白色。Alpha技術(shù)用于發(fā)射光檢測器檢測信號。發(fā)光檢測中,大多數(shù)情況使用白色微孔板,但使用AlphaPlate可抑制交叉干擾并提高檢測精度。
Q5:PerkinElmer 微孔板的特點是什么?
、俨捎锚氂袠渲瞥,可實現(xiàn)較高的光反射效率、低背景和低交叉干擾(下圖)。
、诓粌H擁有白色和黑色微孔板,還擁有淺孔微孔板、灰色微孔板、AlphaPlate、3D培養(yǎng)板等獨特的微孔板系列,使您可針對各應(yīng)用選擇合適的一款產(chǎn)品。也有針對SBS標(biāo)準的微孔板。適用于自動化。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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