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如何排除ELISA試劑盒“邊緣效應”2023資料已更新
閱讀次數:15351 發(fā)布時間:2023/11/27 9:22:27
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  如何排除ELISA試劑盒“邊緣效應”
 

  我們在使用ELISA試劑盒的實驗測定的時候,常發(fā)現有“邊緣效應”,也就是外周孔顯色較中心孔深。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體,在實驗室的常規(guī)ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應”,并且可提高測定的重復性。

  1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

  2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

  3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

  4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

  5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

  6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質使用。

  7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

  8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用充分混勻試劑盒里。

  9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

  10. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

  11. 加入試劑的順序應一致,所有反應板孔溫育的時間一樣。

  12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司

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