技術文獻
大鼠Elisa試劑盒實驗注意事項
ELISA檢測概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應分析)是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。
二、ELISA實驗注意事項
請在本試劑盒標記的有效期內(nèi)使用。
試劑盒的試劑不能與其他批號的試劑或其他來源的試劑混合使用。
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
任何標準品稀釋、操作人員、移液技術、洗滌技術、育溫度、試劑盒保存時間的改變,都將影響結合反應。
本試劑盒在設計上去除或降低了生物學樣本中的一些內(nèi)源性干擾因素,并非所有可能的影響因素都已經(jīng)去除。
濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù) (n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(XnX5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
本試劑不同批號組分不得混用。
三、樣本的要求
1、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20°C保存,但應避免反復凍融。
2、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
3、以上是通用的樣本處理方法,無法涵蓋各種樣本,對于一些特殊樣本,建議實驗人員多參考已發(fā)表的文獻,自行設計合理的樣本處理方法。
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