技術(shù)文獻(xiàn)
本生帶您了解、ELISA實(shí)驗(yàn)操作中需注意的事項(xiàng)
1.儲存.
收到試劑盒后應(yīng)盡快放入冷藏室內(nèi)保存,保存溫度為4℃-8℃.
2.回溫.
試劑盒在使用應(yīng)于室溫(22-27℃)下充分回溫,回溫時(shí)間為40-60分鐘.回溫過程中勿將酶標(biāo)板的包裝袋開封,回溫結(jié)束后再將其從包裝袋中取出使用.
3.樣品稀釋.
樣品稀釋應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求的稀釋倍數(shù)進(jìn)行稀釋.如稀釋倍數(shù)過大,可采用多步法進(jìn)行樣品稀釋.例如:試劑盒要求樣品需進(jìn)行500倍稀釋,可吸取5μl樣品加入245μl樣品稀釋液中,充分混勻后,再吸取10μl混合液加入90μl樣品稀釋液中即可.
4.加樣.
稀釋好的樣品在加入酶標(biāo)板進(jìn)行孵育的過程中,盡可能縮短次加樣和一次加樣的時(shí)間間隔,樣品加好后馬上開始計(jì)時(shí).
5.洗板.
樣品孵育時(shí)間結(jié)束后,馬上甩去孔內(nèi)液體.如多塊酶標(biāo)板需同時(shí)洗滌,可先將板內(nèi)液體甩去,倒扣于吸水紙上,再依次進(jìn)行洗滌.使用洗板機(jī)洗滌時(shí),建議洗滌次數(shù)增加一次.未用完的洗滌液可在4℃-8℃下密封保存1月.
6.顯色.
底物藥片可在顯色3-5分鐘加入底物緩沖液中,混合直到溶解.本試劑是現(xiàn)用現(xiàn)配,未用完的底物溶液可在4℃-8℃下避光保存1周.
7.終止及讀數(shù).
提打開酶標(biāo)儀,加入終止液后立即讀數(shù).
8.同批號試劑盒中的試劑,除酶標(biāo)二抗及陽性對照外,其余均可通用.
9.移液器的正確使用、保存、清潔、校對.
10.實(shí)驗(yàn)室管理
桌面保持整潔,插槍頭戴手套等.
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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