技術(shù)文獻
ELISA試劑盒實驗經(jīng)驗分析
1、要移液槍的準確性,誤差不能超過2%?捎盟吞炱">電子天平進行校正。校正方法自己放狗吧,但有業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支(靠,基本是廢話了)。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時(應該是特別是!)。
3、要在實驗1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定(這個是容易忽視的!)。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去(應該是加樣的時候,板上稀釋不算的吧)。
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能(注意是平行晃動,即上下or左右)。
9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)(老辦法是放入濕盒內(nèi),紗布加點無菌水即可)。
10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干(報紙就免了吧!)。
11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可保存(洗液先用現(xiàn)配不費多少事的)。
12、底物是光敏感的,要在臨用現(xiàn)配(同,避光!)。
13、檢測,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸(終止液為硫酸,小心毀容)。
15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
16、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。
17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能數(shù)據(jù)的準確性。
18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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