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本生詳談影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素
閱讀次數(shù):15704 發(fā)布時間:2020/9/21 14:28:53
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本生詳談影響elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素

影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素
一、試劑盒
1、抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價降低或失活,結(jié)果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高,對雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高,實(shí)驗(yàn)中空白對照OD值偏高或假陽性;
2、酶結(jié)合物濃度過高,也會導(dǎo)致OD值假性增高。
二、試驗(yàn)儀器
1、ELISA試劑盒加樣器是否經(jīng)過校正,酶免測定血清用血量很少,如手工加樣器的性能不好,吸取樣品不,會使結(jié)果忽高忽低;
2、每次洗板前,應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無堵塞。
三、操作
1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,試劑用完及時放回冰箱冷藏,以免造成試驗(yàn)結(jié)果假性降低;
2、加樣時注意勿觸及包被板底部,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;
3、洗滌不充分,會使結(jié)果假性增高,過分洗滌呈假陰性;
4、比色時應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時,底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值升高;
5、抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到完全平衡,依賴于溫度與時間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落,溫度低于4℃,影響反應(yīng)速度

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