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技術(shù)文獻(xiàn)

本生詳解影響ELISA試劑盒曲線的問(wèn)題因素
閱讀次數(shù):15932 發(fā)布時(shí)間:2020/4/8 9:21:18
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標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。我公司技術(shù)人員在處理售后的問(wèn)題中,有不少科研朋友咨詢曲線的問(wèn)題。下面本生生物小編將影響elisa試劑盒曲線問(wèn)題的原因做了總結(jié):

一 OD值不正常的可能原因是:

1、試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃;

2、溫度控制不好,控制正確溫度;

3、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確,控制孵育時(shí)間;

4、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干;

5、陽(yáng)光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避;

6、酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤,酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm;

7、抗體的稀釋錯(cuò)誤,正確的稀釋抗體;

8、水質(zhì)問(wèn)題,用娃哈哈礦泉水代替。

二 白板的可能原因是:

1、洗滌液配制錯(cuò)誤,正確的配制洗滌液;

2、少加液體(錯(cuò)加液體),正確的步驟加液體。

三 無(wú)梯度可能原因是:

1、標(biāo)準(zhǔn)品也污染,換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板;

2、OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次;

3、人為點(diǎn)板,不要點(diǎn)板。

四 線性不好可能原因是:OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次。

elisa試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè),既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。



注:以上資料僅供參考!

原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司

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