技術(shù)文獻(xiàn)
本生闡述—透析袋的使用方法
透析只需要使用用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,這種由半透膜制成的袋狀容器即透析袋。將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。
透析袋預(yù)處理:
透析袋一般制成管狀,其扁平寬度為16 mm~50 mm不等。為防干裂,已用10%的甘油處理過(guò),并含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對(duì)蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害,用必須除去。可先用50%乙醇煮沸1小時(shí),再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,蒸餾水沖洗即可使用。
新透析袋如不作如上的特殊處理,則可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使用。使用時(shí),一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要留三分至一半的空間,以防透析過(guò)程中,透析的小分子量較大時(shí),袋外的水和緩沖液過(guò)量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過(guò)夜時(shí),體積增加50%是正常的。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程小技巧:
檢查透析效果可用1% BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 檢查NaCl、KCl等。
為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。使用者也可以自行設(shè)計(jì)與制作各種簡(jiǎn)易的透析裝置。
透析袋用后處理:
使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,若長(zhǎng)時(shí)間不用,可加少量NaN2,以防長(zhǎng)菌。洗凈涼干的透析袋彎折時(shí)易裂口,用時(shí)必須仔細(xì)檢查,不漏時(shí)方可重復(fù)使用。
透析袋,規(guī)格齊全,多種扁寬和截留分子量可供選擇,同時(shí)還有各種規(guī)格的即用型透析袋,用于生化實(shí)驗(yàn)中生物大分子的制備過(guò)程中,可除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等。即用型透析袋,使用只需用蒸餾水沖洗即可使用,生物技術(shù)的透析袋基本不含硫化物和重金屬離子。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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